O campus Niterói da Universidade Estácio de Sá está localizado no coração da cidade de Niterói. Fica situado a 200 metros da estação das barcas, 30 metros da prefeitura e a poucos minutos de caminhada dos terminais rodoviários norte e sul, que ligam o centro da cidade a vários bairros e cidades vizinhas, tais como: São Gonçalo, Itaboraí, Magé, Rio Bonito, etc. Ocupa o tradicional Colégio Gay Lussac, além de mais três unidades em prédios próximos, incluindo a Clínica de Fisioterapia (FisioNiterói), com equipamentos de última geração, localizada no Niterói Shopping.
Possui 17 laboratórios de informática com computadores em rede e softwares atualizados. Os laboratórios da Estácio estão projetados para atender as especificidades de cada curso e possuem itens de conforto como ar-condicionado, mobiliário e equipamentos para o uso de cada especialidade. A infra-estrutura local oferece vantagens a seus alunos para que a prática acadêmica seja realizada plenamente
